产品目录

本制品可在同一管中进行逆转录和基因组去除两个反应，操作简便，可有效降低复杂加样过程造成的样品污染和RNA降解的风险。本制品中5×Histan One-Step RT SuperMix中含逆转录反应所需的全部试剂(Histan V反转录酶，RNase抑制剂，Oligo(dT)18引物，随机引物，dNTPs，Buffer)，反应时只需加入gDNA Remover Mix、模板RNA和水即可高效地合成第一链cDNA，同时去除基因组DNA污染。另外，本制品提供了5×No-RT Control SuperMix，用于配置无逆转录酶的对照，判断qPCR模板是否来自cDNA。

本试剂盒中的Histan V反转录酶可耐受高达60℃的反应温度，适合具有复杂二级结构的RNA模板的逆转录。同时，该酶增强了与模板的亲和力，非常适合少量模板以及低拷贝基因的逆转录。逆转录产物兼容探针法与染料法qPCR，探针法与染料法qPCR Mix分别推荐TaqMan qPCR MasterMix(多重探针)和TaqMan qPCR MasterMix(染料法)，进行高性能基因表达分析。

• 所有操作均应在冰上进行，且操作过程应避免RNase污染。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
  
• 本制品仅作科研用途！

• 反应体系配置：
  在冰上融化各成分，并充分震荡混匀，并在RNase-free离心管中配置如下体系：
  

  成分	用量
  RNase-free H2O	至20μL
  5×Histan One-Step RT SuperMix	4μL
  gDNA Remover Mix	1μL
  总RNA	10ng～1μg

  No-RT Control反应(可选)：
  

  成分	用量
  RNase-free H2O	至20μL
  5×Histan No-RT Control SuperMix	4μL
  gDNA Remover Mix	1μL
  总RNA	10ng～1μg

• 轻轻混匀，按照如下程序进行逆转录：
  

  温度	时间
  30℃	5min
  55℃	15min
  85℃	5min

  • 逆转录温度：推荐使用55℃。对于高GC含量模板或者复杂模板，可将逆转录温度提高到60℃。
    
  • 逆转录产物可立即用于后续qPCR反应，也可-20℃短期保存，若需长期保存，建议分装后，于-80℃保存，避免反复冻融。